Chromatographie
Différents类型,技术,色谱
色谱技术是:méthodes les plus puissantes pour séparer un échantillon, tel’un mélange de synthèse我们提取生物制剂,每个成分。séparation色谱技术位于séparation两个相中间的物质 :一个相站一个大的表面和一个移动的相站déplace à travers一个相站。
色谱仪的种类和fréquemment utilisés在液相色谱中使用。La différence est attribuable à l’état体质de La phase mobile en chromatography sur colonne。在相色谱中,流动相是véhicule l’échantillon à,它是固体的一个相,在液相色谱中,流动相是溶剂。我们的互动是composés和相站的互动,我们的过程是我们的模式séparation,我们的互动是régie par les différences de polarité,我们的互动是'affinités de liaison spécifiques。La méthode de séparation色谱模式détermine液相色谱技术类型(表 1)。
表 1。液相色谱分离类型
液相色谱分离类型 | 模式séparation色谱在 : |
色谱仪d 'absorption (en phase normal ou inversée) | Polarite |
Chromatographie d 'affinite | 互动联络spécifique |
Chromatographie d 'exclusion sterique | 身材moleculaires |
离子色谱法 | 负责 |
纯化色谱法
色谱吸附法组成了主要的分离和净化方法,例如médicaments,产品,arômes等等。Au départ, les substances sont chimiquement synthétisées ou extrites à partir de plantes, de bactéries ou d 'autres有机物vivants。L ' évaporation sert à center la matière pour simplifier la transformation en al。我们的échantillon是新发明,我们的一项研究是effectuée获得条件séparation色谱优化,généralement par méthodes色谱分析(CCM)或液相色谱分析à高级性能(HPLC)。另一个条件是adaptées réunies,另一个是procédé色谱法是可转换的色谱法préparative。Dans la phase préparative, le composé cible est purifié en quantités élevées par chromatography flash, HPLC préparative你是一个双的组合。如果我们的技术sont utilisées ensemble, la chromatography flash est appliquée à l’étape de prépurification et la HPLC préparative pour atteindre la pureté élevée压花。Une fois les composés séparés, Une deuxième étape de concentration est effectuée soit par évaporation, soit par冻干。À ce stade, le composé est prêt分析这个sa pureté和其他技术的函数,而不是分析熔点,HPLC préparative,研究酶制剂等。
完整的过程après synthèse和提取是illustré à la图1。
图 1。提纯的过程和提取的过程,或者synthèse général
色谱吸附法:première形成液相色谱法,découverte il y + 100 和米伊尔·茨维,一位俄罗斯-意大利植物学家,他使用procédé型色谱法为séparer研究植物的色素。代表色谱技术的是très快速收入méthode essentielle utilisée在synthèse和提取实验室。
在色谱吸附法中,séparation est régie与成分的相互作用,échantillon为固定相和流动相。Les composés ayant des propriétés chimiques différentes (polarités) montrent des affinités (ou forces d 'adhésion)变量为移动相位和静止相位。L 'affinité est influencée par deux propriétés moléculaires, L 'adsorption et la désorption。吸附试验référence à la capacité确定的成分à adhérer à相固定。La désorption, ou solubilité, décrit La façon don uncomposant du mélange se dissout dans La phase mobile。La vitesse à laquelle chacun de l’échantillon se déplace dans phase stationnaire dépend de se propriétés d’吸附/de désorption comme l’illustration La Fig. 2。
图 2。吸附与解吸
色谱分离技术flash vs高效液相色谱préparative
La première publication utilisant La pression élevée est apparue à La fin des années 70,avec une méthode dénommée« 色谱flash »。另外,在tenté d 'augmenter la tail des systèmes de HPLC analytique和donc de rendre également disponibles pour la chromatography préparative (HPLC prep)上。在今天,这两种技术在fréquemment utilisées, mais à des fins différentes :la chromatographie flash est principalement utilisee像兵站de prepurification倒净化器de外面含d 'echantillons可召集的一个决议,tandis主要目的是de la高效液相色谱制备est d 'atteindre一个决议(purete) + elevee苏储备de capacites de inferieures收费。
下面différence两种色谱技术réside那么在下面matière utilisée为相测量仪(taille différente des particules),从cartouche到colonne的维度(diamètre interne [DI]和longueur)和从débit到相移动,来说明一下表2。
表 2。Différences entre la chromatography flash et la HPLC préparative
Chromatographie闪光 |
高效液相色谱制备 |
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---|---|---|
身材des微粒 |
15 - 63µm |
5 - 15µm |
DI de la colonne |
12 - 115毫米 |
10 - 70毫米 |
借记 |
15 - 250ml /min |
5 - 100ml /min |
Capacite de电荷 |
< 300克 |
< 10克 |
压力maximale |
50条 |
300酒吧 |